【三)电泳分离
基因组
亲子鉴定DNA被限制酶完全消化后,被切断成无数长度不同的特异性片段。据粗略估计,基因组DNA被限制酶完全消化后,大约可形成2500万条不同长度的片段。采用电泳技术可将所有酶切片段按照长度大小分离,从而能够检测其中的靶片段。
DNA分子具有两性电解质的性质,pH8.0~8.3,DNA分子带负电荷,在电场的作用下向正极移动。在同一电场强度下,DNA片段长度与片段的迁移率成反比,因此,酶解的DNA分子可以从大到小在凝胶板上分离。DNA指纹分析检测的片段长度集中在3.0~23.okb范围内,亲子鉴定采用o.6%~0. 8%琼脂糖凝胶作电泳介质。凝胶缓冲液多选用0. 04mol/l。pH8.O的Tris-醋酸缓冲液(TAE)。酶解DNA与载样缓冲液混匀后负极侧加样,恒压5V/cm场强条件,电泳时间24~48小时。
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