从骨骼中提取mtDNA所需的二氧化硅悬浮液和骨粉的制备
片段，然后以扩增产物作为第二次扩增的模板，再分别扩增HVR I和HVRⅡ区
段。两次扩增的引物序列见表7-6。
1．HVR I和FIVRⅡ测序模板的扩增 ①M13(-21)L-15997和H-16401引
物扩增产物404bp，是HVR I区段L链测序模板。在L-15997引物的S’端加有
21个碱基(-TGT AAA ACG ACG ACG GCC AGT-)，是测序反应的通用引物。
②Ml3(-21) H-16401和L-15997引物扩增产物404bp，是HVR I区段H链测序
模板。M13(-21) H-16401引物带有测序反应需要的通用引物。双链DNA序列测
定经过L链和H链分别从两个方向测序，比对两链相应碱基的互补性，可以获得
更准确的序列资料。③M13 (-21)L-00029和H-00408引物扩增产物379bp，是
HVRⅡ区段L链测序模板。④M13 (-21)H-00408和L-00029引物扩增产物
379bp，是HVRⅡ区段H链测序模板。
