基本方法

    以mtDNA Hvi区H16391基因座为例，DHPLC基本方法如下。

    1．模板DNA的抽提各种软组织采用IQTM提取试剂盒提取；血液、毛发采

用Chelex-ioo法提取；肋软骨采用改良硅珠法提取，指甲用酚／氯仿有机法提取。

    2．mtDNA的扩增  PCR扩增引物：H16391 5‘-GAGGATGGTGGT-

CAAGGGAC-3’。50FLI扩增体系：模板Ing，引物2.5pmol，Mgz+2. 5mmol/L，

Gold'l-M NA聚合酶2.5U，dNTP O．2mmol,/l_o.扩增条件：95℃变性10分钟，然后

95℃变性20秒、59℃退火30秒、72℃延伸45秒，共32个循环，最后72℃保温15