二)Hp亚型等电聚焦上海亲子鉴定电泳分型
用DEAE-纤-维素将上海亲子鉴定A血清中的Hp纯化·加尿素溶解后,再加裂解ak(即琉基
乙醇、尿素,硼酸、氢氧化钠、碘代乙酰胺)室温放置15min后,加硫代乙酰眩lOmin
后加样。
等电聚焦电泳上海亲子鉴定条件:T-. 5%.C=3%,两-陆电解质(pH 5—7,pH6—8,pH3~
9.5混合)2. 17>6( w/v),电极问距9.5cm,正极液Imol/L磷酸,负极液Imol/L
NaOH.样品加于距负极1::5 cm胶面.上。聚焦条件恒电压1000V.循环水温
looc-两小时后用考马斯亮蓝染色显带。应用蛋白免疫技术分型Hp有新的进
展。电泳后采用蛋白吸印加l联免疫分析技术可检出浓缩3000倍人尿液中的
Hp普通型。 ,.
(三)上海亲子鉴定DNA分型
近年来DNA分析上海亲子鉴定技术检测Hp编码序列,可直接从DNA水平分型。例如用
Hpa链特异性探针对人类基因组DNA HindⅢ及Xbal消化产物进行杂交分型,
可检出保存15—18个月之久的Hp2.HplF及FlplS的型别。目前以PCR扩增