上海亲子鉴定DHPLC原理图

网中峰3，4分别为同源双链峰，峰l，2由异源杂合双链形成。在理想实验条件

    上海亲子鉴定下应该IqJ现四个可区分的峰，但HPLC图谱很大程度上取决于

    上海亲子鉴定实验选定的温度及DNA序列

分钟，4℃保存。

    3．样本顶处理取lOfjIPCR扩增产物采用95℃变性4分钟，然后每分钟递减0.5℃至55℃，继续在55℃保温15分钟以充分形成同源双链及异源双链。

    4．建立DHPLC最佳检测温度及运行条件  将来自两个不同个体的扩增产物混合后变性复性，在WAVEMAKER V4.1软件自动计算出的检测温度上下2℃范嗣内选择最佳检测温度。洗脱液A:0.Imol/L TEAA(三乙基胺乙酞盐)，0. 25 ~6CAN(乙腈)；洗脱液B：0.Imol./L TEAA，25 ~6CAN;流速：0.90ml/min;进样体积：5vl;应用类型：突变检测；柱温：Tm±(3～4℃)；梯度：按照软件自动设定的梯度o