2．上海亲子鉴定PCR扩增  反应体积25fil，含1.5mmol/L MgCLz，1×缓冲液，200temol/L

dNTP，200tcg BSA，1.25U Taq DNA聚合酶．引物1、2各125pmol/L，引物3、4各

62. 5pmol/L，模板DNA 8til。扩增热循环参数：95℃2分钟；95℃30秒，60℃10

秒，72℃45秒，共30个循环；72℃延伸10分钟。

    3．上海亲子鉴定酶J消化扩增产物中直接加入Kpnl和Alul各2.5U，置37℃孵化30分钟。

    4．上海亲子鉴定垂直PAGE分离和银染  电泳用T6%，C 5%的PAG，内含尿素4mol/

L、0.5×TBE，电泳条件恒压550V，40分钟。设置pBR322/Msp 1分子量标准作

对照。凝胶银染。

    5．上海亲子鉴定基因分型  6种基因型谱带清晰，分型明确。6种基因型的复合扩增产物

均由200(199)bp和159bp两条带组成。但经酶切消化后共出现4种特异片段长

度：片段1为200(199)bp、片段2为171bp、片段3为159bp、片段4为118bp。6

种基因型判定：片段1+3为AA型，片段1+2十3为A()型，片段1+3+4为AB

型，片段1+4为BB型，片段1+2十3+4为BO型，片段2+3为00型(图6-10)。