(一)亲子鉴定PCR基本原理
PCR扩增靶亲子鉴定DNA的过程类似于体内DNA的半保留复制。它是利用人工合成的一对寡核苷酸引物(primer),分别与亲子鉴定待扩增DNA片段的两侧翼序列互补,在DNA聚合酶催化下,以靶DNA序列为模板,四种dNTP( dATP、dTTP、dCTP和dGTP)为原料,经过高温变性、低温退火和中温延伸“三步曲”的循环,使靶DNA片段经过约30个循环周期后达到百万倍的扩增。
变性(denaturation):通过加热(通常加热至90℃以上)使模板DNA双链间氢键断裂,双链解离形成两条单链DNA的过程A退火( annealing):又称复性(renaturation),将反应体系降温(通常降至60℃以下).引物与单链模板DNA按碱基互补配对原则重新形成模板一引物杂化双链的过程。
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